A terapia celular autóloga emerxente que utiliza plasma rico en plaquetas (PRP) pode desempeñar un papel auxiliar en varios plans de tratamento da medicina rexenerativa.Hai unha demanda global non satisfeita de estratexias de reparación de tecidos para tratar pacientes con enfermidades musculoesqueléticas (MSK) e da columna vertebral, artrose (OA) e feridas crónicas complexas e refractarias.A terapia PRP baséase no feito de que o factor de crecemento plaquetario (PGF) apoia a cicatrización de feridas e a cascada de reparación (inflamación, proliferación e remodelación).Avaliáronse unha serie de formulacións diferentes de PRP a partir de estudos humanos, in vitro e animais.Non obstante, as recomendacións dos estudos in vitro e en animais adoitan levar a resultados clínicos diferentes, porque é difícil traducir os resultados de investigacións non clínicas e as recomendacións de métodos en tratamento clínico humano.Nos últimos anos, avanzouse na comprensión do concepto de tecnoloxía PRP e de axentes biolóxicos e propuxéronse novas instrucións de investigación e novas indicacións.Nesta revisión, discutiremos os últimos avances na preparación e composición do PRP, incluíndo a dose plaquetaria, a actividade dos leucocitos e a regulación inmune innata e adaptativa, o efecto da 5-hidroxitriptamina (5-HT) e o alivio da dor.Ademais, discutimos o mecanismo PRP relacionado coa inflamación e a anxioxénese durante a reparación e rexeneración dos tecidos.Finalmente, repasaremos os efectos dalgúns fármacos na actividade do PRP.
O plasma rico en plaquetas autólogo (PRP) é a parte líquida do sangue periférico autólogo despois do tratamento e a concentración de plaquetas é maior que a liña de base.A terapia con PRP utilízase para varias indicacións durante máis de 30 anos, o que provocou un gran interese no potencial do PRP autóxeno na medicina rexenerativa.O termo axente biolóxico ortopédico introduciuse recentemente para tratar enfermidades musculoesqueléticas (MSK) e conseguiu resultados prometedores na capacidade de rexeneración de mesturas heteroxéneas de células bioactivas de PRP.Na actualidade, a terapia con PRP é unha opción de tratamento axeitada con beneficios clínicos e os resultados dos pacientes informados son alentadores.Non obstante, a inconsistencia dos resultados dos pacientes e os novos coñecementos supuxeron desafíos para a viabilidade da aplicación clínica do PRP.Unha das razóns pode ser o número e variabilidade dos sistemas PRP e tipo PRP no mercado.Estes dispositivos son diferentes en termos de volume de recollida de PRP e esquema de preparación, o que resulta en características únicas de PRP e axentes biolóxicos.Ademais, a falta de consenso sobre a estandarización do esquema de preparación de PRP e o informe completo dos axentes biolóxicos en aplicación clínica levou a resultados de informes inconsistentes.Realizáronse moitos intentos para caracterizar e clasificar o PRP ou os produtos derivados do sangue en aplicacións de medicina rexenerativa.Ademais, propuxéronse derivados plaquetarios, como os lisados de plaquetas humanas, para a investigación ortopédica e in vitro con células nai.
Un dos primeiros comentarios sobre PRP publicouse en 2006. O foco principal desta revisión é a función e o modo de acción das plaquetas, o efecto do PRP en cada etapa da fervenza de curación e o papel central do factor de crecemento derivado das plaquetas. en varias indicacións de PRP.Na fase inicial da investigación do PRP, o principal interese no PRP ou PRP-xel era a existencia e funcións específicas de varios factores de crecemento plaquetario (PGF).
Neste artigo, discutiremos amplamente o último desenvolvemento de diferentes estruturas de partículas de PRP e receptores da membrana celular plaquetaria e os seus efectos na regulación inmune do sistema inmunitario adaptativo e innato.Ademais, comentarase en detalle o papel das células individuais que poden existir no frasco de tratamento con PRP e a súa influencia no proceso de rexeneración do tecido.Ademais, describiranse os últimos avances na comprensión dos axentes biolóxicos de PRP, a dose plaquetaria, os efectos específicos de glóbulos brancos específicos e os efectos da concentración de PGF e das citocinas sobre os efectos nutricionais das células nai mesenquimales (MSC), incluíndo o PRP dirixido a diferentes ambientes celulares e tecidos despois da transdución do sinal celular e dos efectos paracrinos.Do mesmo xeito, discutiremos o mecanismo PRP relacionado coa inflamación e a anxioxénese durante a reparación e rexeneración dos tecidos.Finalmente, revisaremos o efecto analxésico do PRP, o efecto dalgúns fármacos na actividade do PRP e a combinación de PRP e programas de rehabilitación.
Principios básicos da terapia clínica con plasma rico en plaquetas
Os preparados de PRP son cada vez máis populares e amplamente utilizados en varios campos médicos.O principio científico básico do tratamento con PRP é que a inxección de plaquetas concentradas no lugar lesionado pode iniciar a reparación do tecido, a síntese de novo tecido conxuntivo e a reconstrución da circulación sanguínea mediante a liberación de moitos factores bioloxicamente activos (factores de crecemento, citocinas, lisosomas). proteínas de adhesión responsables de iniciar a reacción en cascada hemostática.Ademais, as proteínas plasmáticas (por exemplo, fibrinóxeno, protrombina e fibronectina) están presentes nos compoñentes do plasma pobres en plaquetas (PPP).O concentrado de PRP pode estimular a liberación hiperfisiolóxica de factores de crecemento para iniciar a curación da lesión crónica e acelerar o proceso de reparación da lesión aguda.En todas as fases do proceso de reparación do tecido, unha variedade de factores de crecemento, citocinas e reguladores de acción local promoven as funcións celulares máis básicas mediante mecanismos endócrinos, paracrinos, autócrinos e endócrinos.As principais vantaxes do PRP inclúen a súa seguridade e a enxeñosa tecnoloxía de preparación dos equipos comerciais actuais, que se poden empregar para preparar axentes biolóxicos que poidan ser amplamente utilizados.O máis importante é que, en comparación cos corticosteroides comúns, o PRP é un produto autóxeno sen efectos secundarios coñecidos.Non obstante, non hai unha regulación clara sobre a fórmula e a composición da composición de PRP inxectable, e a composición de PRP presenta grandes cambios nas plaquetas, o contido de glóbulos brancos (WBC), a contaminación de glóbulos vermellos (RBC) e a concentración de PGF.
Terminoloxía e clasificación do PRP
Durante décadas, o desenvolvemento de produtos PRP utilizados para estimular a reparación e rexeneración de tecidos foi un importante campo de investigación de biomateriais e ciencia farmacéutica.A fervenza de cicatrización dos tecidos inclúe moitos participantes, incluíndo plaquetas e os seus factores de crecemento e gránulos de citocinas, glóbulos brancos, matriz de fibrina e moitas outras citocinas sinérxicas.Neste proceso en cascada, producirase un complexo proceso de coagulación, incluíndo a activación plaquetaria e a posterior densificación e α- A liberación do contido das partículas plaquetarias, a agregación de fibrinóxeno (liberado polas plaquetas ou libre no plasma) na rede de fibrina e a formación. de embolia plaquetaria.
PRP "universal" simula o inicio da curación
Nun primeiro momento, o termo "plasma rico en plaquetas (PRP)" chamábase concentrado de plaquetas usado na medicina de transfusión de sangue, e aínda se usa hoxe.Inicialmente, estes produtos de PRP só se usaron como adhesivo de tecidos de fibrina, mentres que as plaquetas só se usaban para soportar unha polimerización de fibrina máis forte para mellorar o selado dos tecidos, en lugar de como estimulante da cicatrización.Despois diso, a tecnoloxía PRP foi deseñada para simular o inicio da fervenza de curación.Posteriormente, a tecnoloxía PRP resumiuse a través da súa capacidade para introducir e liberar factores de crecemento no microambiente local.Este entusiasmo pola entrega de PGF adoita ocultar o importante papel doutros compoñentes nestes derivados do sangue.Este entusiasmo intensifícase aínda máis pola falta de datos científicos, as crenzas místicas, os intereses comerciais e a falta de normalización e clasificación.
A bioloxía do concentrado de PRP é tan complexa como o propio sangue, e pode ser máis complexa que as drogas tradicionais.Os produtos PRP son biomateriais vivos.Os resultados da aplicación clínica de PRP dependen das características intrínsecas, universais e adaptativas do sangue do paciente, incluíndo outros outros compoñentes celulares que poden existir na mostra de PRP e do microambiente local do receptor, que pode estar en estado agudo ou crónico.
Resumo da terminoloxía PRP confusa e sistema de clasificación proposto
Durante moitos anos, os profesionais, científicos e empresas estiveron afectados polo malentendido inicial e os defectos dos produtos PRP e os seus diferentes termos.Algúns autores definiron a PRP como só con plaquetas, mentres que outros sinalaron que a PRP tamén contén glóbulos vermellos, varios glóbulos brancos, fibrina e proteínas bioactivas cunha concentración aumentada.Polo tanto, moitos axentes biolóxicos PRP diferentes foron introducidos na práctica clínica.É decepcionante que a literatura adoita carecer dunha descrición detallada dos axentes biolóxicos.O fracaso da estandarización da preparación de produtos e o posterior desenvolvemento do sistema de clasificación levou ao uso dun gran número de produtos PRP descritos por diferentes termos e abreviaturas.Non é de estrañar que os cambios nas preparacións de PRP leven a resultados inconsistentes dos pacientes.
Kingsley utilizou por primeira vez o termo "plasma rico en plaquetas" en 1954. Moitos anos despois, Ehrenfest et al.Propúxose o primeiro sistema de clasificación baseado en tres variables principais (contido de plaquetas, leucocitos e fibrina), e moitos produtos PRP dividíronse en catro categorías: P-PRP, LR-PRP, fibrina pura rica en plaquetas (P-PRF) e leucocitos. PRF rico (L-PRF).Estes produtos prepáranse mediante sistema pechado totalmente automático ou protocolo manual.Mentres tanto, Everts et al.Subliñouse a importancia de mencionar os glóbulos brancos nos preparados de PRP.Tamén recomendan o uso da terminoloxía adecuada para denotar versións inactivas ou activadas de preparados de PRP e xel de plaquetas.
Delong et al.propuxo un sistema de clasificación PRP chamado plaquetas, glóbulos brancos activados (PAW) baseado no número absoluto de plaquetas, incluíndo catro intervalos de concentración de plaquetas.Outros parámetros inclúen o uso de activadores plaquetarios e a presenza ou ausencia de glóbulos brancos (é dicir, neutrófilos).Mishra et al.Proponse un sistema de clasificación similar.Uns anos máis tarde, Mautner e os seus colegas describiron un sistema de clasificación (PLRA) máis elaborado e detallado.O autor demostrou que é importante describir o reconto absoluto de plaquetas, o contido de glóbulos brancos (positivo ou negativo), a porcentaxe de neutrófilos, eritrocitos (positivo ou negativo) e se se utiliza a activación esóxena.En 2016, Magalon et al.Publicouse a clasificación DEPA baseada na dose de inxección de plaquetas, a eficiencia de produción, a pureza do PRP obtido e o proceso de activación.Posteriormente, Lana e os seus colegas presentaron o sistema de clasificación MARSPILL, centrándose nas células mononucleares de sangue periférico.Recentemente, o Comité de Normalización Científica defendeu o uso do sistema de clasificación da Sociedade Internacional de Trombose e Hemostase, que se basea nunha serie de recomendacións de consenso para estandarizar o uso de produtos plaquetarios en aplicacións de medicina rexenerativa, incluíndo produtos plaquetarios conxelados e desconxelados.
Con base no sistema de clasificación de PRP proposto por varios profesionais e investigadores, moitos intentos infrutuosos de estandarizar a produción, definición e fórmula de PRP para ser usado polos médicos poden sacar unha conclusión xusta, o que é probable que non suceda nos próximos anos. , a tecnoloxía dos produtos clínicos de PRP segue a desenvolverse e os datos científicos mostran que se necesitan diferentes preparados de PRP para tratar diferentes patoloxías en condicións específicas.Polo tanto, esperamos que os parámetros e variables da produción ideal de PRP continúen crecendo no futuro.
O método de preparación de PRP está en curso
Segundo a terminoloxía PRP e a descrición do produto, lanzáronse varios sistemas de clasificación para diferentes formulacións de PRP.Desafortunadamente, non hai consenso sobre o sistema de clasificación completo do PRP ou calquera outro sangue e produtos sanguíneos autólogos.Idealmente, o sistema de clasificación debería prestar atención a varias características do PRP, definicións e nomenclatura axeitada relacionadas coas decisións de tratamento dos pacientes con enfermidades específicas.Na actualidade, as aplicacións ortopédicas dividen a PRP en tres categorías: fibrina pura rica en plaquetas (P-PRF), PRP rica en leucocitos (LR-PRP) e PRP deficiente en leucocitos (LP-PRP).Aínda que é máis específico que a definición xeral do produto PRP, as categorías LR-PRP e LP-PRP obviamente carecen de especificidade no contido de glóbulos brancos.Debido aos seus mecanismos de defensa inmune e do hóspede, os glóbulos brancos afectaron moito á bioloxía intrínseca das enfermidades crónicas dos tecidos.Polo tanto, os axentes biolóxicos PRP que conteñen glóbulos brancos específicos poden promover significativamente a regulación inmune e a reparación e rexeneración dos tecidos.Máis concretamente, os linfocitos son abundantes no PRP, producindo un factor de crecemento semellante á insulina e apoiando a remodelación do tecido.
Os monocitos e os macrófagos xogan un papel fundamental no proceso de regulación inmune e no mecanismo de reparación dos tecidos.A importancia dos neutrófilos no PRP non está clara.LP-PRP determinouse como a primeira preparación de PRP mediante unha avaliación sistemática para lograr resultados eficaces de tratamento da OA conxunta.Non obstante, Lana et al.O uso de LP-PRP no tratamento da OA do xeonllo é oposto, o que indica que os glóbulos brancos específicos xogan un papel importante no proceso inflamatorio antes da rexeneración do tecido, porque liberan moléculas proinflamatorias e antiinflamatorias.Descubriron que a combinación de neutrófilos e plaquetas activadas tiña máis efectos positivos que efectos negativos na reparación dos tecidos.Tamén sinalaron que a plasticidade dos monocitos é importante para a función non inflamatoria e reparadora na reparación dos tecidos.
O informe do esquema de preparación de PRP na investigación clínica é moi inconsistente.A maioría dos estudos publicados non propuxeron o método de preparación de PRP necesario para a repetibilidade do esquema.Non hai un consenso claro entre as indicacións de tratamento, polo que é difícil comparar os produtos PRP e os seus resultados de tratamento relacionados.Na maioría dos casos informados, a terapia de concentración plaquetaria clasifícase baixo o termo "PRP", mesmo para a mesma indicación clínica.Para algúns campos médicos (como a OA e a tendinose), avanzouse na comprensión dos cambios dos preparados de PRP, as vías de entrega, a función plaquetaria e outros compoñentes de PRP que afectan á reparación dos tecidos e á rexeneración dos tecidos.Non obstante, é necesaria máis investigación para chegar a un consenso sobre a terminoloxía PRP relacionada cos axentes biolóxicos PRP para tratar de forma completa e segura certas patoloxías e enfermidades.
Estado do sistema de clasificación PRP
O uso da bioterapia de PRP autóloga está preocupado pola heteroxeneidade dos preparados de PRP, a denominación inconsistente e a mala estandarización das directrices baseadas na evidencia (é dicir, hai moitos métodos de preparación para producir frascos de tratamento clínico).Pódese prever que o contido absoluto de PRP, a pureza e as características biolóxicas do PRP e dos produtos relacionados varían moito e afectan á eficacia biolóxica e aos resultados dos ensaios clínicos.A selección do dispositivo de preparación de PRP introduce a primeira variable clave.Na medicina rexenerativa clínica, os profesionais poden utilizar dous equipos e métodos de preparación de PRP diferentes.Unha preparación usa un separador de células sanguíneas estándar, que opera sobre o sangue completo recollido por si mesmo.Este método utiliza tecnoloxía de separación de tambor ou disco de centrífuga de fluxo continuo e pasos de centrífuga dura e suave.A maioría destes dispositivos úsanse en cirurxía.Outro método é utilizar tecnoloxía e equipos centrífugos por gravidade.A centrifugación de alta forza G úsase para separar a capa amarela de ESR da unidade sanguínea que contén plaquetas e glóbulos brancos.Estes dispositivos de concentración son máis pequenos que os separadores de células sanguíneas e pódense usar xunto á cama.En diferenza ģ – A forza e o tempo de centrifugación conducen a diferenzas significativas no rendemento, concentración, pureza, viabilidade e estado activado das plaquetas illadas.Nesta última categoría pódense usar moitos tipos de equipos comerciais de preparación de PRP, o que provoca cambios no contido do produto.
A falta de consenso sobre o método de preparación e a validación do PRP segue levando á inconsistencia do tratamento con PRP, e hai grandes diferenzas na preparación do PRP, na calidade da mostra e nos resultados clínicos.Verificáronse e rexistráronse os equipos PRP comerciais existentes segundo as especificacións do fabricante propietario, o que resolve as diferentes variables entre os equipos PRP dispoñibles actualmente.
Comprender a dose plaquetaria in vitro e in vivo
O efecto terapéutico do PRP e doutros concentrados de plaquetas deriva da liberación de varios factores implicados na reparación e rexeneración dos tecidos.Despois da activación das plaquetas, as plaquetas formarán un trombo plaquetario, que servirá como matriz extracelular temporal para favorecer a proliferación e diferenciación celular.Polo tanto, é xusto asumir que unha dose de plaquetas máis alta levará a unha maior concentración local de factores bioactivos plaquetarios.Non obstante, a correlación entre a dose e concentración de plaquetas e a concentración do factor de crecemento bioactivo das plaquetas liberadas e do fármaco pode ser incontrolable, porque hai diferenzas significativas no reconto de plaquetas inicial entre pacientes individuais e hai diferenzas entre os métodos de preparación de PRP.Do mesmo xeito, varios factores de crecemento plaquetario implicados no mecanismo de reparación do tecido están presentes na parte plasmática do PRP (por exemplo, o factor de crecemento do fígado e o factor de crecemento similar á insulina 1).Polo tanto, unha dose de plaquetas máis alta non afectará o potencial de reparación destes factores de crecemento.
A investigación PRP in vitro é moi popular porque os diferentes parámetros destes estudos pódense controlar con precisión e os resultados pódense obter rapidamente.Varios estudos demostraron que as células responden ao PRP dunha forma dependente da dose.Nguyen e Pham demostraron que concentracións moi altas de GF non eran necesariamente propicias para o proceso de estimulación celular, o que podería ser contraproducente.Algúns estudos in vitro demostraron que altas concentracións de PGF poden ter efectos adversos.Unha razón pode ser o número limitado de receptores da membrana celular.Polo tanto, unha vez que o nivel de PGF é demasiado alto en comparación cos receptores dispoñibles, terán un impacto negativo na función celular.
Importancia dos datos de concentración plaquetaria in vitro
Aínda que a investigación in vitro ten moitas vantaxes, tamén ten algunhas desvantaxes.In vitro, debido á interacción continua entre moitos tipos de células diferentes en calquera tecido debido á estrutura do tecido e ao tecido celular, é difícil replicar in vitro nun ambiente de cultivo único bidimensional.A densidade celular que pode afectar a vía do sinal celular adoita ser inferior ao 1% da condición do tecido.O tecido en placas de cultivo bidimensional impide que as células estean expostas á matriz extracelular (ECM).Ademais, a tecnoloxía de cultivo típica levará á acumulación de residuos celulares e ao consumo continuo de nutrientes.Polo tanto, o cultivo in vitro é diferente de calquera condición de estado estacionario, subministración de osíxeno ao tecido ou intercambio repentino de medio de cultivo, e publicáronse resultados contradictorios, que comparan o efecto clínico do PRP co estudo in vitro de células específicas, tipos de tecidos e plaquetas. concentracións.Graziani e outros.Descubriuse que in vitro, o maior efecto sobre a proliferación de osteoblastos e fibroblastos conseguiuse coa concentración de plaquetas de PRP 2,5 veces superior ao valor inicial.En cambio, os datos clínicos proporcionados por Park e os seus colegas mostraron que despois da fusión espinal, o nivel de plaquetas de PRP debe aumentarse máis de 5 veces que a liña base para inducir resultados positivos.Tamén se informaron resultados contraditorios similares entre os datos de proliferación de tendóns in vitro e os resultados clínicos.
（Os contidos deste artigo son reimpresos e non ofrecemos ningunha garantía expresa ou implícita sobre a exactitude, fiabilidade ou integridade dos contidos deste artigo, e non somos responsables das opinións deste artigo, por favor entendelo.）
Hora de publicación: 01-mar-2023